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一、初(chu)始(shi)设(she)置

收到(dao)蛋白循(xun)环(huan)反应仪后，请仔细(xi)检查外包装，确保(bao)在(zai)运输过程中(zhong)未收到(dao)损(sun)坏。如(ru)果(guo)有损(sun)坏迹(ji)象，立即通知承运人(ren)，并提(ti)出索(suo)赔(pei)。某些运营商(shang)在(zai)交付的(de)一定时间(jian)内(nei)，必须承担赔(pei)偿费用。

1.包装内容

打开集装箱(xiang)检查的内(nei)容（见表1）。遗失物(wu)品报(bao)告。

表1 包装清单

¨ 警告

不要在(zai)危(wei)险环境下(xia)使用蛋白循环反应仪。

若(ruo)有液体溢出，请立即清(qing)理，以防止电击(ji)。

如果有机械损坏的(de)迹象(xiang)，则(ze)不(bu)要继(ji)续使(shi)用仪器。

2.使(shi)用前须知

蛋白循环反应仪交(jiao)付(fu)的(de)所有主要(yao)组(zu)件已经组(zu)装，必(bi)须保(bao)持原有包(bao)装组(zu)件的(de)情况下(xia)，返回(hui)原厂(chang)修理(li)。

仪器(qi)请平(ping)放(fang)(fang)在实验台上，请勿倾(qing)斜放(fang)(fang)置或摆放(fang)(fang)在不(bu)平(ping)整(zheng)的台面上。

“电源开关”位于该装置的左侧，此开关应处于“关”位置，连接电(dian)源线到仪器(qi)上，正确的插(cha)好插(cha)头，此时仪器(qi)就可以使用了。

3.可能需(xu)要的附加材料(liao)

 (1)蛋(dan)白(bai)循环反应试剂盒：分(fen)为6组和12组两种型(xing)号。

(2)废(fei)液吸取真空泵。

(3)洗涤缓冲液：PBS或TBS缓冲液。
二、仪器原理

该(gai)蛋(dan)白循环反(fan)应仪采用的(de)是本公(gong)司的(de)核心(xin)技术——抗(kang)原(yuan)-抗(kang)体(ti)(ti)循(xun)环反应(ying)技(ji)术(shu)(shu)(shu)，此(ci)(ci)技(ji)术(shu)(shu)(shu)能(neng)够大大地加快(kuai)抗(kang)原(yuan)-抗(kang)体(ti)(ti)结合(he)(he)速(su)度(du)。当用(yong)于(yu)医(yi)疗检(jian)(jian)(jian)测(ce)中(zhong)(zhong)，可(ke)以缩短检(jian)(jian)(jian)测(ce)反应(ying)时间(jian)，增加检(jian)(jian)(jian)测(ce)灵敏度(du)，使(shi)得快(kuai)速(su)检(jian)(jian)(jian)测(ce)更加快(kuai)捷、准确。基(ji)于(yu)抗(kang)体(ti)(ti)-抗(kang)原(yuan)的(de)检(jian)(jian)(jian)测(ce)技(ji)术(shu)(shu)(shu)，如酶联免(mian)疫法（ELISA），穿流(liu)法（flow through），侧流(liu)免(mian)疫层析法(lateral flow immunoassay),一(yi)(yi)(yi)般都包(bao)括一(yi)(yi)(yi)个(ge)溶液中(zhong)(zhong)的(de)抗(kang)原(yuan)与固定在(zai)一(yi)(yi)(yi)个(ge)支持体(ti)(ti)上(shang)的(de)抗(kang)体(ti)(ti)结合(he)(he)的(de)过程。这(zhei)一(yi)(yi)(yi)过程一(yi)(yi)(yi)般需几十分钟到(dao)几个(ge)小时才(cai)能(neng)完成。快(kuai)速(su)检(jian)(jian)(jian)测(ce)方法，如侧流(liu)免(mian)疫层析法,灵敏度(du)低的(de)一(yi)(yi)(yi)个(ge)重要原(yuan)因就是抗(kang)原(yuan)-抗(kang)体(ti)(ti)的(de)不完全结合(he)(he)。循(xun)环反应(ying)技(ji)术(shu)(shu)(shu)通过抗(kang)原(yuan)-抗(kang)体(ti)(ti)反复、快(kuai)速(su)接触，来实现充分、特异(yi)性的(de)结合(he)(he)。图(tu)1为此(ci)(ci)技(ji)术(shu)(shu)(shu)的(de)示意图(tu)。

图1通(tong)过抗(kang)原-抗(kang)体循环技(ji)术(shu)方法(fa)将抗(kang)原抗(kang)体进行最(zui)大化(hua)的结合

在(zai)此方(fang)法中，抗体被固(gu)定在(zai)一个硝酸纤维素膜或PVDF膜(mo)上，当抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)溶液与膜(mo)孵育时，抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)溶液在真(zhen)空或压(ya)力作用下，以类似一个过(guo)(guo)(guo)(guo)滤(lv)过(guo)(guo)(guo)(guo)程(cheng)穿过(guo)(guo)(guo)(guo)膜(mo)。在此过(guo)(guo)(guo)(guo)程(cheng)中(zhong)，抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)与抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)有效(xiao)结合。这一过(guo)(guo)(guo)(guo)程(cheng)被自动(dong)地(di)重复多(duo)次以达到抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)-抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)的(de)最(zui)(zui)大(da)(da)结合。因(yin)为这个循(xun)环(huan)过(guo)(guo)(guo)(guo)程(cheng)非常快(kuai)速,可(ke)以缩小(xiao)(xiao)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)反应(ying)所(suo)需时间。清洗过(guo)(guo)(guo)(guo)程(cheng)也是(shi)以这种(zhong)类似过(guo)(guo)(guo)(guo)程(cheng)完成，非常有效(xiao)地(di)去除非特异(yi)性结合的(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)。运用抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)-抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)循(xun)环(huan)反应(ying)技术可(ke)以将抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)-抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)结合过(guo)(guo)(guo)(guo)程(cheng)从(cong)几个小(xiao)(xiao)时缩短到几分钟(zhong)，从(cong)而(er)大(da)(da)大(da)(da)加快(kuai)了(le)蛋白质(zhi)检测(ce)的(de)速度。抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)-抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)循(xun)环(huan)反应(ying)技术保证(zheng)了(le)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)-抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)的(de)最(zui)(zui)大(da)(da)结合，从(cong)而(er)提(ti)高(gao)了(le)检测(ce)的(de)灵敏度。

三、操作
请在操作机器前熟悉机器，所有的操作通过手动的电阻屏。

1.安装反应盒
    将蛋白循环反应盒按照对应尺寸，安装在反应台上。

2.程序界面介绍  
    打开仪器开关即可进入以下界面，界面分为四个部分，分别是参数设置部分、状态显示部分、数值输入部分和控制键部分。

（1）参数设置

a. Speed：设置反应台升降的快慢，设定范围为0—10，建议(yi)设定速度为2或3。

b. Distance：设置反应台升降的距离，设定范围为0—10，建议设定距离为5或6。

c. Cycles：设置(zhi)反(fan)(fan)应台(tai)循(xun)环的次数，反(fan)(fan)应台(tai)上(shang)下往返(fan)一(yi)次为一(yi)个循(xun)环。

（2）状态显示

a. Time Stared：显示循环程序从开始运行(xing)到目前(qian)的时间。

b. Time Lapsed：显示离所有循环(huan)完(wan)成所需的(de)时间。

c. Cycles Passed：显示当前已完成(cheng)几次(ci)循(xun)环操(cao)作。

（3）数值输入

    根(gen)据实验需要，点(dian)击数字输入相(xiang)应的参(can)数设定值，点(dian)击“＜”可(ke)清除光标前一位的数字(zi)，点击“CE”可(ke)清除当前参(can)数栏的所有数字(zi)。

（4）控制键：

a. Up：根(gen)据(ju)所设定的(de)速(su)度(du)Speed，向上移动设定的距(ju)离(li)Distance。

b. Down：根据所设定的速度Speed，向(xiang)下(xia)移动设定(ding)的距(ju)离Distance。

c. Start：设(she)定好三个程序参数后，点击此键开(kai)始(shi)循环程序。反应台必须位(wei)于初始(shi)位(wei)置才能使用此键。

d. Stop：暂停(ting)正在进行的循环程序(xu)，可以在任何(he)时(shi)候暂停(ting)程序(xu)。

e. Resume：当一个操(cao)(cao)(cao)作(zuo)程(cheng)序(xu)开始运行后，因(yin)为某些原因(yin)您(nin)暂时停(ting)止了该操(cao)(cao)(cao)作(zuo)，您(nin)可以从刚才(cai)停(ting)止的地方恢复，继续运行未完(wan)成的操(cao)(cao)(cao)作(zuo)程(cheng)序(xu)。

f. Reset：让机器回到初始状态, 只能(neng)在机器未运(yun)行时进行重置，机器运(yun)行期(qi)间不能(neng)进行重置。

注意：

¨ 打开(kai)机器后，请先将门关闭，再运行操作，以防夹手(shou)。

¨ 在(zai)循环程序进行的过程中，你可以随时(shi)暂(zan)停操作(zuo),也可随时恢复操作

3.具体操作

（1）设置运行参数

a. 点击Speed，设置反应台升(sheng)降(jiang)的速度(du)，设定范围为0—10，建议速度(du)设置为2—3。

b. 点击Distance，设(she)置反(fan)应(ying)台升(sheng)降(jiang)的距(ju)离，设(she)定(ding)范围为(wei)0—10，建议反(fan)应(ying)液体积(ji)为(wei)500ul时距(ju)离设(she)置5或(huo)6。

c. 点(dian)击(ji)Cycles，设置循环反应次数，反应台(tai)升降一次为(wei)一个循环。

（2）运行程序

a. 设置以上参数后，点击Up或Down，可让反应台进行单次上升或下降（Distance的数值）；

b. 点(dian)击(ji)Start，可让反应台进行已设定数(shu)量的循环；

c. 在反应台(tai)进行循环反应的过程中，出(chu)现任何(he)问题可以点(dian)击Stop，立即暂停反应台(tai)的升降，如需继续程序可点(dian)击Resume；

d. 程(cheng)序运行(xing)完成(cheng)后，点击Reset，让(rang)机器回复到初始状态；

e. 反应的(de)(de)进(jin)行时间和已(yi)运(yun)行的(de)(de)循环次数可见界面上方右侧的(de)(de)三个状态栏。

4.举例

（1）加(jia)待测(ce)血清(qing)：将已(yi)包(bao)被捕获抗体的反(fan)应(ying)盒安装(zhuang)在机(ji)器上(shang)，加(jia)入(ru)待测(ce)血清(qing)500ul，设(she)置Speed为(wei)2，Distance为(wei)5，Cycles为(wei)10。设(she)置完成(cheng)后点击Start开始循环(huan)反(fan)应(ying)。

（2）清(qing)洗：10次循(xun)环结束后，用废(fei)液(ye)吸取(qu)真空泵将废(fei)液(ye)吸去，再加入500ul PBS缓(huan)冲液(ye)，以同样(yang)的Speed和Distance，每(mei)次3个循(xun)环进行清(qing)洗，每(mei)次清(qing)洗完吸去废(fei)液(ye)，共清(qing)洗3次。

（3）加(jia)hrp溶(rong)液(ye)：再加(jia)入500ul含有(you)标记(ji)hrp抗体的(de)检测液(ye)，以同(tong)样的(de)Speed和Distance进行10次循环。

（4）清洗(xi)：同第2步操作。

（5）显色：加入ECL化学发(fa)光底物(wu)或者(zhe)TMB底物(wu)显色液，观察实验结果。

四、注意事项

1. 机器运行过程(cheng)中，请(qing)勿将门(men)打开，防止手被夹伤。

2. 为(wei)防止触电，非专业(ye)人(ren)员请(qing)勿打开机箱，否则会有电击(ji)危险。

3. 避免(mian)将设备(bei)暴露在日光直接照(zhao)射下或其他热(re)源处，以(yi)免(mian)损坏(huai)敏(min)感(gan)元件(jian)。

4. 避免(mian)受潮或雷电所(suo)引致(zhi)的损坏，勿将本产品(pin)暴露在雨中或过(guo)分(fen)潮湿处使用。

5. 如遇不正常现象出现时，应立刻停止(zhi)使用本机。如：冒烟(yan)、声音异(yi)常或(huo)异(yi)味。

6.当您发现(xian)任(ren)何异常(chang)时，应(ying)立刻(ke)切断电(dian)源开关(guan)及拔掉电(dian)源插头(tou)。